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[成果] 1800120342 甘肃
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:养羊业是中国畜牧业重要组成部分,也是少数民族地区的传统农业支柱产业之一。随着农村经济结构的调整和退牧还草政策的实施,养羊业生产方式逐渐从放牧散养到集约化规模化转变、养殖区域也从传统牧区向农区扩展,羊只引种、调运频繁,由山羊支原体山羊肺炎亚种、绵羊肺炎支原体等支原体引起的羊支原体肺炎迅速流行,成为影响养羊业健康发展的重要疾病问题。该成果为解决这一生产实际问题,从2005年开始,历经10个项目的持续研发,完成了从流行病学调查、诊断技术与疫苗研究、配套整合及生产应用的全过程,形成了羊支原体肺炎系列新型疫苗、诊断试剂盒、技术标准和专利等集约式成果,提高了中国羊病防控技术水平,为中国现阶段养羊业健康发展、动物防疫技术标准化、畜产品进出口检疫和国际贸易争端解决提供了技术支撑。取得的主要成果有:获得国家新兽药证书5项,取得自主发明技术4项,制定国家标准2项、行业标准1项,获得甘肃省科技进步二等奖2项,发表论文27篇(含SCI论文9篇),编著著作2部。主要技术内容:(1)查清了中国羊支原体肺炎的优势病原:采用病原分离鉴定、分子检测和血清学方法查清了中国羊支原体肺炎的优势病原,包括山羊支原体山羊肺炎亚种、绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种,且山羊支原体山羊肺炎亚种单一感染为主,绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种混合感染多见,原有国内仅有的组织灭活疫苗“山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗”是由单一的丝状支原体山羊亚种制备,对流行的3种优势病原不能提供有效保护,找到了免疫动物继续发病的症结,也为新疫苗研制指明了方向。同时发现了中国流行的山羊支原体山羊肺炎亚种菌株只有一个基因型,率先测定和注释了山羊支原体山羊肺炎亚种的全基因组,为诊断技术和新型疫苗靶标筛选提供了理论基础。(2)解决了病原支原体体外培养技术瓶颈:针对支原体难以培养的难题,对16种支原体培养基进行了筛选和配方优化,最终确定以丙酮酸钠作为碳源的MTB培养基,提高了支原体培养速度,使生长滴度在2~4天达到109ccu/mL,提高了病原分离率,为诊断技术和全菌灭活疫苗的研发提供了技术平台。(3)建立了系列快速诊断技术并开发了诊断试剂盒:通过对病原支原体16srRNA、arcD、Hsp70、H2等多个基因靶标的序列分析和比对,设计了12对普通PCR引物和4套环介导等温扩增PCR(LAMP)引物,建立了3种优势病原的特异性PCR检测技术和1种LAMP快速诊断技术,克服了传统的病原学检测方法中病原分离耗时、生化鉴定可靠性差的难题;通过对病原支原体膜蛋白、菌体蛋白、荚膜多糖和分泌多糖等多种抗原进行筛选,建立了针对3种优势病原抗体的IHA检测技术,其中,2种获得了新兽药证书,满足了生产实际中调运检疫和临床诊断的需要;研制了绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种抗体间接ELISA检测方法并获得了1种新兽药证书,提高了检测的敏感性,满足了实验室血清学诊断和疫苗免疫效果评价的需求。(4)针对中国优势病原及流行特点,创制了系列新型疫苗:针对3种流行优势病原及山羊支原体山羊肺炎亚种单一感染为主、绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种混合感染多见的流行病学特征,利用支原体体外培养技术,筛选了理想的制苗菌株,创制了羊支原体肺炎二联灭活疫苗(丝状支原体山羊亚种M8701株+绵羊肺炎支原体MoGH3-3株)、山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗(山羊支原体山羊肺炎亚种M1601株)两种新疫苗,获得了新兽药证书并实现了产业化生产。两种新疫苗产品均利用病原支原体纯培养物,经浓缩、纯化、适当配比并与油佐剂乳化后制备,实现了羊支原体肺炎疫苗的生产技术由组织灭活疫苗向全菌培养物疫苗的更新换代,解决了原有的疫苗不适应流行特点、不能全面提供免疫保护的问题,也避免了组织灭活疫苗使用活羊制苗的质量不可控风险,提升了中国羊支原体肺炎疫苗质量,带动了羊支原体肺炎疫苗产品的升级换代,满足了防疫需求。
[成果] 1800120521 河南
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:口蹄疫(FMD)、猪蓝耳病(PRRS)、猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)等主要疫病严重危害畜牧业生产、公共卫生安全和对外贸易。该研究围绕以上4种疫病进行了多种高通量、快速鉴别诊断分子病原学和血清学检测方法研究;建立了鉴别FMDV通用和分型多重PCR/荧光定量PCR方法,鉴别不同致病力PRRSV多重PCR和荧光定量PCR方法,CSFV Nested-PCR和荧光定量PCR方法,鉴别PRV Gd/Ge基因复合PCR和荧光定量PCR方法;建立了检测FMDV(O)、PRRSV、CSFV和PRV的胶体金试纸条及ELISA方法等;为疫病净化监测和快速诊断提供了技术手段。根据以上4种疫病感染、流行及监测情况,研究、筛选了可有效防控其发生的疫苗和免疫程序。建立了规模猪场疫病风险评估模型,制定了风险评估防控技术规范。制定了规模化猪场生物安全技术规范,指导养殖企业落实生物安全防控措施,提升生物安全防护水平。围绕FMD、PRRS、CSF、PR等猪场主要疫病,建立了多种高通量、快速鉴别诊断分子病原学和血清学检测方法,用于4种疫病的净化监测和快速诊断。在FMD、PRRS、CSF、PR等4种疫病防控用疫苗的研究和筛选、抗体消长规律研究、免疫程序的优化等方面进行了创新性研究。在规模化猪场猪瘟风险评估模型的建立和规模化猪场生物安全技术规范制定方面进行了创新性研究。在FMD、PRRS、CSF、PR等4种疫病净化关键技术集成方案和净化评审标准的制定及其推广应用等方面进行了创新性研究。
[成果] 1800120191 北京
S85 应用技术 技术检测 公布年份:2017
成果简介:对中国边境口岸地区虫媒进行大范围调查研究,系统掌握可传播重要外来动物疫病的虫媒在重大战略地域的种类、分布、组成、流动特性及扩散态势,构建基础信息库和地理信息系统;查清不同虫媒携带不同外来动物疫病病原状况;探讨虫媒传播病原的传播规律与传播方式;研发病原-虫媒-宿主生物链阻断、防治制剂,建立科学的阻断机制与综合防控示范基地,为虫媒性外来动物疫病防控决策提供科学依据。系统调查了中国边境口岸虫媒的分布以及携带病原情况。虫媒传播方式和感染谱研究。研制筛选消杀虫媒高效、环保生物化学制剂。开展了外来动物虫媒性疫病监测预警平台建设。开展了虫媒性动物疫病综合防控示范基地建设。
[成果] 1700160138 甘肃
R18 应用技术 疾病预防控制及防疫活动 公布年份:2016
成果简介:蜱是一类陆地脊椎动物的体表寄生虫,除吸血外,还能传播多种病原体导致各种疾病。近年来,因蜱叮咬造成人及家畜死亡的病例屡有报道,成为人们关注的焦点新闻,而蜱的正确鉴定是防控蜱及蜱传病的关键。自20世纪90年代分子生物学技术广泛应用到蜱的系统分类学以来,人们解决了一些长期利用传统分类学无法阐明的难题,但仍有很多种类的分类地位存在争议。相比之下,中国对蜱的系统分类学研究更为薄弱。该项目以中国分布的一些争议种(包括4种中国特有种和亚洲璃眼蜱的两个亚种)为研究对象,在申请人及课题组前期研究的基础上,采用现代分子生物学技术并结合传统的分类学研究方法,在系统进化分析的基础上,对这些争议种的分类地位进行研究,解决了青海血蜱、日本血蜱、亚洲璃眼蜱两个亚种的分类地位问题。
[成果] 1700160316 甘肃
S85 应用技术 兽用药品制造 公布年份:2016
成果简介:农业科技成果转化项目《猪用CpG DNA免疫佐剂的中试与示范》(项目编号2013GB23260590)来源于国家成果转化项目,执行期间共获得各类经费支持190万元,该项目实施期间完成了项目实施的各种条件准备、项目经费配套和筹措、中试生产基地和实验基地的选择与建设工作以及新型分子免疫佐剂的产业化生产和示范推广工作等,建立了以全自动微生物发酵罐为基础的CpG DNA新型免疫佐剂规模化生产工艺1套和中试生产线1条,中试生产免疫佐剂720万头份;选择和完善了高效疫苗生产中试线1条、实验基地2个;已在广东、山东、四川、甘肃、陕西等省区的多个地县养殖场实施高效疫苗的推广应用,制定了"猪用CpG DNA免疫佐剂高效疫苗示范推广的实施方案、免疫接种程序与评价标准",结合国家或地方或养殖场的防疫计划统一实施,示范规模达560万头次,累计至少产生间接经济效益4000万元,经济、社会和生态效益显著。
[成果] 1700160754 甘肃
S85 应用技术 兽用药品制造 公布年份:2016
成果简介:该项成果属于免疫佐剂领域,公开了一种水溶性复合免疫佐剂以及制备该种佐剂的方法,在相应的疫苗上使用这种佐剂取得良好的效果。该项成果使用两种具有佐剂潜力的新分子相复合配伍成为新型复合佐剂,实验研究证明这种新型佐剂达到了比传统油佐剂更为安全,高效的免疫增强作用,具有更为广阔的市场前景。
[成果] 1700160770 甘肃
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2016
成果简介:该项目以危害严重的人兽共患弓形虫病、棘球蚴病、多头蚴病、猪囊虫病、旋毛虫病、巴贝斯虫病及蜱为对象,围绕其病原人兽共患的弓形虫、棘球蚴、多头蚴、猪囊虫、旋毛虫、巴贝斯虫及蜱的转录组、蛋白组、miRNA组展开研究。通过3年的实施,该项目已完成了计划任务,在弓形虫、棘球蚴、多头蚴、猪囊虫、旋毛虫、巴贝斯虫及蜱的转录组、蛋白组、miRNA组等方面的研究取得了重要进展,鉴定出一批关键分子;为有效防控这些人兽共患寄生虫病提供了科学基础和技术支撑。本群体发表标注该项目的相关SCI收录论文135篇,中文核心期刊论文34篇;主编专著1本,主译出版世界兽医经典著作《兽医临床寄生虫学》。获授权国家发明专利16项。
[成果] 1700160787 甘肃
S86 应用技术 其他畜牧业 公布年份:2016
成果简介:该项目的目标就是要在合作猪前期近亲培育的基础上,按照实验动物学质量控制标准进一步对其进行异地环境适应驯化、近交定向繁殖,逐步培育形成合作小型猪家系的基本育种单元,使之成为合作小型猪培育、生产和应用研究的基地;通过分析与合作小型猪体型、免疫和抗病等关键性状相关的分子遗传特性,定向遗传控制培育拥有独立知识产权的实验用高原型小型猪品系,填补国际这一领域的空白,支撑和引领中国兽医学、医学和生物产业的跨越式发展。该项目依据实验动物学的要求,按照"合作猪实验动物化培育、近交系培育和SPF化培育"三阶段实施的总体战略布局和构想,并将该项目作为总体战略目标实施的第一阶段。通过项目的实施已对合作小型猪的生活习性、生长发育、繁殖性能进行了10多年的异地适应性观察,通过近交遗传控制已培育到F11-12代,其遗传性状日趋稳定,初步建立了全黑、六端白、松鼠背和大黑白花合作小型猪4个近交家系的种群繁殖单元,总种群达50头以上。为了探讨遗传、营养和环境对生长发育控制的影响,重点分析了生长激素分子的基因组和功能基因的组成、结构和多态性,已初步证实该小型猪多态性丰富,其体型小的特性主要由遗传基因控制而非营养、气候环境因素决定。在成功分析合作小型猪生长激素分子基因结构及其遗传多态性的基础上,重点对其免疫抗病关键分子MHC分子(猪白细胞抗原SLAⅠ类和Ⅱ类分子)、TCRs(T细胞抗原受体)和PRRs(模式识别受体)如TLRs分子进行了克隆分析,探讨其结构组成、多样性与抗病的分子基础,为免疫抗病基础研究提供理论依据。重点以培育的合作小型猪为动物模型观察其在免疫学基础研究以及在疫苗免疫效果评价中的应用效果,这为合作小型猪的开发利用提供了理论依据。在项目执行以来,制定合作小型猪培育技术规范标准(草案)2项,共公开发表核心期刊论文6篇,会议论文3篇,参加中国工程院科技论坛等相关学术会议3次,做特邀报告2场;培养研究生3名,已形成小型猪培育、生产和应用研究的创新团队1个。总之,该项目整体超额完成了合同所规定的任务,实施效果良好,达到了预期的目标。
[成果] 1700160078 甘肃
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2016
成果简介:该研究率先在国内层面上利用基因敲除的技术,研究弓形虫钙依赖蛋白在弓形虫入侵中的作用。该研究能够快速进行弓形虫缺失株的构建,能够在有相应实验条件的实验室开展。具有高效准确的特点。通过该方法初步探讨了弓形虫钙依赖蛋白激酶对弓形虫入侵的作用机制。该研究只是在实验室进行实验,用于基础研究。未能大面积推广应用的主要原因是该方法在技术上尚具有一定难度不易于掌握,需要较为严格的实验条件。
[成果] 1700160479 甘肃
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2016
成果简介:该成果包括以下几个方面的内容: 1.初步确定病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。接种不同的羊痘病毒后,通过免疫荧光技术分析病毒感染不同时间点的的复制水平,初步确定初病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。 2.完成羊痘病毒8个RNA聚合酶的分析,确定2个可能与脱壳蛋白复制相关。通过DNAStar软件的Protean程序分析SPPV ORF 051表达蛋白的亲疏水性疏水性,结果表明,该蛋白由18种氨基酸组成,Leu和Val两种氨基酸相对含量较多,编码64个氨基酸,蛋白质分子量理论值7249.6,理论等电点(PI):9.13;原子组成:C315H539N91O93S5负电荷残基(Asp+Glu)共有6个,正电荷残基(Arg+Lys)共有10个。不稳定系数(Instability index)为45.55,表明这个蛋白性质稳定。脂肪系数为115.87,总平均亲水性为-0.057。ORF065氨基酸亲疏水性分析发现,SPPV编码185个氨基酸,蛋白质分子量理论值21225.8,仅由19种氨基酸组成,Leu和IIe相对含量较多,理论等电点(PI):6.91.原子组成:C983H1563N239O275S3负电荷残基(Asp+Glu)共有21个,正电荷残基(Arg+Lys)共有21个。不稳定系数(Instability index)为43.37,表明这个蛋白性质稳定。脂肪系数为118.49,总平均亲水性为0.143。将SPPV ORF051和ORF065的基因序列应用NCBI网站分别BLAST进行同源性比较,结果表明二者均与羊痘病毒属的成员有高于97%的同源性,而与其他物种之间不存在同源性。因此可以选作RNA干扰的靶向基因。 3.建立了检测羊痘病毒复制的real time PCR。通过分析NCBI上已公布的羊痘病毒属中SPPV SPPV-SA等8株病毒全基因组序列,选取第68开放阅读框中一段大小为64bp的保守区域,设计并合成一对引物和一条MGB-Taqman探针,建立了Q-PCR和标准曲线,建立了羊痘病毒荧光定量PCR方法。该方法的建立为检测羊痘病毒及监测在细胞复制过程的发生、发展提供了一种有效的手段。 4.绘制了分离株病毒的一步生长曲线,为痘病毒复制脱壳过程中观察时间点的选择奠定基础。 5.成功进行了RNA干扰抑制羊痘病毒复制的研究。通过选择0RF09RPO30、P32进行了siRNA的设计和抑制,在此基础上通过RNA水平、蛋白质水平应用荧光显微镜观察、流式细胞检测仪监测分析、RT-PCR分析,之后再进行体外对病毒的干扰研究。 该成果为阐明痘病毒增殖复制过程中脱壳机制提供依据,对羊痘病毒抗病毒新型靶标分子鉴定和新兴药物的设计具有重要意义。
[成果] 1700160514 甘肃
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2016
成果简介:弓形虫病是由一种专性细胞内寄生的机会性致病原虫弓形虫寄生在人和动物的有核细胞内而引起的一种人兽共患寄生虫病。弓形虫病的防控尚无特效的药物和疫苗,主要原因是对弓形虫病防控的基础研究不足,特别是对不同基因型弓形虫在蛋白质组的差异及其与致病及毒力的关系尚不十分清楚。在该项研究中,首先利用荧光差异双向凝胶电泳(2D DIGE)技术结合基质辅助激光解析离子吸附飞行时间串联质谱(MALDI-TOF MS/MS)法对不同基因型的4个弓形虫虫株速殖子的蛋白质组进行了比较研究;其次,通过同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术结合质谱方法进行了弓形虫PRU虫株(基因II型)速殖子、缓殖子、未孢子化卵囊和孢子化卵囊四个不同发育阶段的蛋白质组差异比较研究和弓形虫PRU虫株(基因II型)和PYS虫株(ToxoDB#9基因型)孢子化卵囊的蛋白质组差异比较研究;然后应用生物信息学的方法对鉴定成功的差异蛋白质进行GO功能注释分析,通过KEGG Pathway显著性富集确定了差异蛋白参与的最主要生化代谢途径和信号转导途径。最后,对代表性弓形虫毒力相关差异表达蛋白的基因进行了克隆、序列分析及免疫保护作用评价。该项目研究成果阐明了不同基因型弓形虫在不同发育阶段的蛋白表达改变情况,有助于理解不同基因型弓形虫在表型上的差异,这些结果可能为弓形虫病的免疫预防、诊断和治疗找到新的关键分子。
[成果] 1700320062 北京
[S85, TQ45] 应用技术 农药制造 公布年份:2016
成果简介:该项目针对农兽药有效利用率低、毒副作用和残留危害的突出问题,在“863”重大项目等国家科技计划支持下,采用纳米技术与新材料等前沿科技方法开展多学科交叉研究,发明了高效安全纳米农兽药制备技术与系列新产品,突破了提高传统农兽药有效性和安全性的关键技术瓶颈,主要发明点如下:创制了一批载体新材料,构建了新型纳米载药系统,为高效安全纳米农兽药创制奠定了基础。基于典型农兽药的理化性质与功能特性,采用纳米材料制备技术,合成与筛选了一批低成本、无毒性与无次生污染的纳米载体、助剂和佐剂,构建了纳米微乳、微囊、微球和固体脂质体等新型纳米载药系统,创立了纳米载药系统的组装合成、结构调控与功能修饰方法,揭示了其改善药物水溶性、分散性、化学稳定性以及靶向传输与控制释放等剂型功能的作用机制,开辟了高效安全纳米农兽药制备新途径。发明了环境友好型纳米农药制备技术,创制了水基化纳米微乳剂与纳米微囊缓释剂等新剂型,提高有效利用率30%以上。建立了熔融乳化法制备纳米微乳剂和界面聚合法制备纳米微囊剂等核心技术,创制了30种大吨位与主导型的杀虫剂、杀菌剂和除草剂纳米农药新产品,可作为乳油、可湿性粉剂等传统剂型替代产品,显著改善农药叶面沉积、滞留与控释性能,减少脱落、流失与分解等药剂损失,杜绝“三苯”等有害溶剂排放,减少施药次数与剂量,大幅度降低农产品残留与环境污染负荷,实现节本增效与节量减排。发明了高效低残毒纳米兽药制备技术,创制了纳米乳注射剂、纳米脂质体缓释剂等纳米兽药新剂型,提高生物利用度40%以上。建立了自乳化法制备水包油型纳米乳液和固体脂质体等核心技术,创制了阿维菌素类、青蒿琥酯和替米考星等广谱抗生素纳米兽药新剂型,克服了传统剂型溶解性、稳定性和长效性差,溶剂与助剂毒性危害大等功能缺陷,实现了优良的肺靶向与缓释性,显著提高了生物利用度、延长了半衰期,增强了药效功能。首创了纳米佐剂疫苗制备技术,创制了重组质粒和脂质体纳米疫苗新剂型,免疫效果增强40%以上,建立了缓释靶向微囊化纳米佐剂与疫苗核心制备技术,创制了CpGDNA、CpG-IFN、CpG-IL4和IL2等纳米免疫佐剂与疫苗系列产品,突破了口蹄疫、猪瘟和猪圆环病毒病等传统疫苗免疫效果不全面、持续期短、佐剂毒副作用大等瓶颈问题,提高了以Thl型为主的免疫反应,持效期延长30%以上,显著降低了毒副作用。该成果获得国家授权发明专利26项、新产品登记证书120个,发表论文132篇。核心技术与产品在20余家相关企业产业化应用。近三年纳米农药累计推广面积3.34亿亩,纳米佐剂疫苗产品累计推广9270万头,累计新增销售收入12.86亿元,获间接经济效益390亿元。部分研究成果获省部级一等奖1项。农业部科教司和中国农学会分别组织专家对该成果进行了鉴定与评价,解思深、刘旭、夏咸柱和沈建忠院士组成的专家组评价结论认为:该成果整体上达到国际先进水平,其中环境友好型农药纳米乳剂、高效纳米免疫佐剂制备技术居国际领先。
[成果] 1600500162 甘肃
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2015
成果简介:该课题在“863”项目的资助下,开展了大量的口蹄疫基因工程疫苗研究工作,现已取得了一系列较好的前期研究结果,特别是在亚洲Ⅰ型空衣壳疫苗研究方面取得了突破性进展。该课题采用家蚕杆状病毒表达体系,在蚕蛹中高效表达出亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒的空衣壳抗原,用夹心ELISA法检测,其抗原效价可达1:10240~40960左右,比用常规细胞培养法制备的灭活病毒的抗原效价高100~300倍。在获得转基因生物安全证书后,进行了亚洲Ⅰ型口蹄疫空衣壳抗原规模化生产、纯化方法和疫苗制备工艺的研究。经过一系列方法的处理,使空衣壳抗原的纯度达70%~90%以上。将获得的空衣壳抗原与206佐剂按1:1的比例混合,试制疫苗3批,进行了疫苗的安全试验,免疫效力试验、免疫持续期试验和疫苗保存期试验。经过一系列试验,表明试制的疫苗安全性良好、疫苗的免疫效力超过国际标准规定的PD50达3.0的要求,免疫持续期可达6个月,疫苗在4℃可保存12个月,获得了转基因生物安全证书和全国八个省区的销售证。已完成了《口蹄疫亚洲I型空衣壳疫苗》的临床试验申请书的撰写和申报工作,准备进行疫苗的临床区域试验。
[成果] 1700300007 山东
S85 应用技术 兽用药品制造 公布年份:2016
成果简介:该项目属于农业科学的畜牧、兽医领域。 口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病等重大动物疫病,不仅危害养殖业安全,造成巨大的经济损失,而且影响畜产品安全和社会公共卫生安全。针对这些问题,该项目组在国家863计划、山东省“泰山学者”建设工程等相关课题和项目支持下,经过10余年的科研攻关,首次建立了乳酸杆菌为载体的DNA疫苗研发平台,揭示了山东省及周边地区2005-2015年FMDV、CSFV、HP-PRRSV病原学及分子流行病学演变规律,建立了口蹄疫GeXP-PCR和猪瘟、高致病性猪蓝耳病多重RT-PCR等快速检测技术,成功研制了三类新兽药芪术增免合剂,同建立有效的重大动物疫病防控技术体系,为这三种重大动物疫病的科学防控提供了技术支撑。主要科学内容包括以下6个方面: 首次建立了乳酸杆菌为载体的DNA疫苗研发平台,研制了FMDVVP1DNA疫苗,该疫苗可产生良好的体液免疫和细胞免疫反应,为口蹄疫等重大动物疫病的预防提供了一种新技术。 历经11年的系统研究,揭示了山东省及周边地区2005-2015年FMDV、CSFV、HP-PRRSV病原学及分子流行病学演变规律。明确了2005年引起山东省AsiaⅠ型疫情的毒株属于GV群,2009年山东省A型口蹄疫流行毒株为Sea-97G1;CSFV主要流行的基因型为1.1亚型和2.1亚型,2.1亚型中的优势流行毒株是2.1b;HP-PRRSV仍然是山东省猪群中的优势流行毒株,新发现5亚群毒株1个、6亚群毒株2个,6亚群的DZQH-15为基因重组毒株。 研究建立了口蹄疫GeXP-PCR和猪瘟、高致病性猪蓝耳病多重RT-PCR等快速检测技术,提高了疫病诊断能力。获得国家发明专利5项,受理国家发明专利5项,获得实用新型专利1项。主要包括:猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和猪瘟病毒的RT-PCR检测及其专用引物(专利授权号ZL201210034157.7),检测口蹄疫AsiaI型病毒的引物、检测试剂盒和制备方法(专利授权号ZL201410464773.5),检测口蹄疫A型、O型和AsiaI型病毒的试剂盒和制备方法(专利授权号ZL201410464443.6);取得“便捷式猪唾液采样装置”实用新型专利1项(专利授权号ZL201320691418.2)。 研制的中兽药“芪术增免合剂”降低了免疫应激反应,提高了免疫效果,获得三类新兽药证书1个(证号(2015)新兽药证字33号)。创制一种用于母猪保健的药物及制备工艺(专利授权号ZL201010242881.X)。 持续开展疫苗免疫效果跟踪评价,检测样品70余万份,为疫苗毒株筛选、疫情风险评估与预警、防控策略制定提供了技术支撑。对疫苗注射的有效性、安全性、临床副反应开展了系统研究和评估,对免疫中存在的免疫失败、疫苗株与野毒株不匹配等问题提出解决方案并有效施行。 研究建立了免疫监测、快速诊断、疫情处置相配套的防控技术,制定地方标准3个,获得计算机软件著作权1个(软著登字第0622071号),出版技术书籍3部,发表SCI收录和中文核心期刊论文30篇。 采取产学研相结合的推广模式,项目技术在基层畜牧兽医体系和养殖企业中得到了广泛的推广和应用,有效的预防和控制FMD,CSF,HP-PRRS等重大动物疫病的发生和流行。近三年来,已获得经济效益99191.92万元,未来2年还可能产生经济效益99940.16万元,取得了显著的经济、社会和生态效益。项目完成人获得2010年度山东省农牧渔业丰收奖二等奖1项。
[成果] 1700320300 北京
S85 应用技术 农业科学研究与试验发展 公布年份:2016
成果简介:口蹄疫是危害猪、牛、羊等家畜最为严重的世界性烈性传染病,病原高度变异,新毒株不断出现,疫情传播迅猛,经济损失和社会影响巨大。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告疫病,总结百年防控经验,制定并推行以免疫为核心措施的全球控制策略。2000年以来,亚洲I型、O型和A型3种血清型的5种新流行毒株先后传入中国,引起24省区暴发118次疫情,原有疫苗难以应对,致使每年近18亿头猪、牛、羊处于高危状态,急需高效疫苗。该项目组以国家防疫需求为导向,针对疫苗研制中种毒选育难度大、抗原制备生物安全风险高、传统工艺疫苗质量差的三大世界性技术难题,自2002年以来历经13年联合攻关,取得了如下成果:创建了制苗种毒分子选育技术平台,解决了传统制苗种毒选育耗时长、成功率低的难题,成功创制了3种高效灭活疫苗,及时遏制了口蹄疫大流行。发明了单质粒口蹄疫病毒拯救系统,实现了制苗种毒的定向设计构建,突破了流行毒株不能驯化为制苗种毒的技术难题,制备出产能高、抗原性好、稳定性强的A型制苗种毒,填补了世界动物卫生组织抗原库的空白。首创了工业化固相口蹄疫抗原多肽合成技术体系,建立了没有生物安全风险的全新抗原制备方法,创制了2种猪口蹄疫O型合成肽疫苗,成为疫苗制造领域里程碑式的重大突破。创新了具有自主知识产权的病毒规模化悬浮培养和抗原浓缩纯化生产工艺,解决了产能低、易污染、批间差异大、副反应严重等技术难题,建立了中国全新的口蹄疫疫苗产业化技术体系,打破了国外技术壁垒和垄断,使中国口蹄疫疫苗质量达到国际领先水平。该成果创制的6种高效疫苗在31个省市推广应用,免疫猪、牛和羊50.89亿头,中国口蹄疫得到有效控制。亚洲I型口蹄疫自2009年6月以来,已连续80个月全国没有发生;O型口蹄疫逐年减少,2010年18起,2014年2起,2015年无报道疫情;A型口蹄疫2013年17起,2014年5起,2015年3起。累计销售疫苗75.38亿毫升,总计收入56.01亿元,新增利润22.87亿元,实现利税6.88亿元;出口越南、朝鲜、蒙古等国,创汇196.5万美元。成果应用产生间接经济效益1145.94亿元。该项目发表论文218篇,出版专著4部,获国家授权发明专利10项、授权的其他知识产权18项,制定疫苗制造检验规程、国家标准7项,获得国家新兽药注册证书一类1件、三类2件,应急生产批文2项,获得省级科技进步一等奖2项。
[成果] 1500170122 甘肃
S85 应用技术 农业科学研究与试验发展 公布年份:2014
成果简介:该发明公开一种快速鉴别诊断被检马属动物是否感染马泰勒虫病的检测试剂盒,以及这种试剂盒的制备方法和使用方法。该发明的诊断马泰勒虫的检测试剂盒内至少有四条马泰勒虫特异性引物TeF3、TeB3、TeFIP和TeBIP,为方便鉴别区分工作,该发明的试剂盒内还可以有标准马泰勒虫阳性的基因组DNA;标准驽巴贝斯虫阳性的基因组DNA;标准马梨形虫阴性的马基因组DNA;标准马梨形虫阴性的驴基因组DNA;标准马梨形虫阴性的骡基因组DNA,及相关的酶、试剂等。是一种面向国内外的基层马属动物养殖业、广大农牧民、赛马业、宠物业和进出口检疫机构的操作简便、安全、可靠、特异性好、敏感性高、价格低廉的鉴别马泰勒虫的诊断检测方法。
[成果] 1400560232 甘肃
S85 应用技术 [农业科学研究与试验发展, 畜牧服务业] 公布年份:2014
成果简介:布鲁氏菌病是一种危害极为严重的人畜共患性传染病。国家对防治该病,保护人民身体健康,非常重视。中国一些地区布病流行,原因复杂,其中重要的是缺乏快速、特异、敏感的病原检测诊断方法。该项目研制的套式PCR和Lamp方法解决了这一问题。大大提高了对该病的诊断准确率,对有效控制布病的发生和流行,保护畜牧业发展,保证动物食品安全,维护人民生命和健康将发挥重要作用。该成果应用分子生物学方法,选择目的菌的Omp25和Bcsp31两组基因,在国内首次建立了重大人畜共患病病原布鲁氏菌核酸检测的、快速、稳定、特异、高效的nested-PCR和Lamp诊断方法;克隆和构建了布鲁氏菌主要的免疫原性蛋白基因Bcsp31的酵母真核表达系统并成功表达,为布病亚单位疫苗及系列快速血清学诊断方法的建立奠定了基础。上述三项技术均获得国家发明专利授权,为国家布病根除计划的实施提供了技术支持。在应用方面,该成果布鲁氏菌检测方法适合基层和现场检测,为布病的病原的快速诊断和有效防控提供了新的技术手段,安全性良好;而且两种方法均具有很高的特异性、敏感性和稳定性;因此,现逐渐广泛用于生产。其中,建立的布病PCR检测技术2007年被国家定为农业行业标准[NY/T1467-2007],该技术在全国推广应用,在快速诊断家畜布病方面,发挥着积极的作用。2007年-2012年,该研究小组应用布病研究成果诊断检测布病,也收到了可观的经济效益。此外,近年来,一些地区动物疫病预防控制中心等单位也开始采用该成果套式PCR和Lamp方法进行家畜布病检测。总之,近年来通过该研究技术及时监测疫情,有效控制了某些地区布病的流行,收到了显著的经济效益和社会效益。
[成果] 1400560334 甘肃
S85 应用技术 [兽用药品制造, 畜牧服务业] 公布年份:2014
成果简介:口蹄疫缅甸98(Mya98)疫苗的研制及应用。课题来源与研究背景:该项成果是在农业部动物疫情监测与防治项目(编号1251216103105)经费和本单位自筹经费支持下完成的。口蹄疫是全球性动物传染病,对世界畜牧业生产和畜产品贸易危害巨大。通过对猪牛羊等易感家畜免疫接种疫苗来预防口蹄疫,是国际上普遍认可和行之有效的措施。但由于口蹄疫病毒的频繁变异和跨区域传播特性,要求所使用的疫苗必须能够应对不断出现的变异毒株和境外传入的新流行毒,疫苗的有效性成为决定免疫控制政策成败的关键。中国从2001年开始对O型口蹄疫实施强制免疫,控制了大流行,疫情仅呈零星散发。但在2009年7月之后,由于出现了新的流行毒株,使中国的口蹄疫防控形势再度严峻。根据该研究团队国家口蹄疫参考实验室的流行病学监测结果,2009年7月发现常年流行于缅甸、越南、老挝、泰国等东南亚国家的口蹄疫O型东南亚拓扑型(SEATopotype)缅甸98谱系(MYA98)病毒传入中国。2010年初之后,该毒株在中国多个省份引发严重疫情,免疫畜群50%以上发病,非免疫畜群100%发病,造成的经济损失和社会影响很大。同一时期,该毒株还在日本、韩国、蒙古、俄罗斯、中国香港、中国台湾等国家和地区传播,引起猪、牛、羊、鹿等多种动物发病,疫情呈蔓延态势。为了有效控制疫情,研制针对性疫苗成为国家急需。研究的目的与意义该项研究,一是满足国家急需,研制出安全、有效的口蹄疫缅甸98(MYA98)疫苗,为控制疫情提供科技手段。二是建立基于流行病学研究的疫苗种毒筛选系统,为应对不断变化的流行毒提供技术支持。三是集成先进的疫苗生产及质量控制技术,提升中国口蹄疫疫苗的产能和质量。该项成果的应用,将大幅度提高中国口蹄疫免疫防控的成效,显著减少国家、地方和广大农牧民因口蹄疫暴发而遭受的损失,保障中国畜牧业健康发展和农民增收。主要科技创新:该成果在深入开展流行病学研究的基础上,筛选培育了新的疫苗种毒,并利用新技术、新工艺研制出针对性疫苗,推广使用后效果十分显著,为控制疫情发挥了关键作用。1、流行病学研究:收集鉴定2010年以来田间流行毒203株,并与1997年之后的44株流行毒代表株进行了系统比较和分析,查明了疫情毒株及其来龙去脉,明确了该毒株的传播区域、生态分布、感染致病性和繁殖特性。2、疫苗研制:筛选培育出免疫原性强、抗原谱广、生产性能好的优良疫苗种毒O/Mya98/BY/2010株。经三批试制疫苗和三批中试疫苗试验,表明安全有效,对中国主要流行的O型口蹄疫3个拓扑型代表株的免疫保护效力均高于6个PD50。3、疫苗生产技术及工艺创新:利用自主研发的悬浮培养、浓缩、纯化等技术,创新疫苗生产工艺,提高疫苗车间产能3倍,大幅度提升了疫苗质量。社会经济效益:该疫苗2011年2月获得农业部临时生产批文,开始大量生产用于紧急防疫,受到广大用户的欢迎,其防疫效果得到广泛肯定。2013年7月获得国家三类新兽药证书。截止目前,该疫苗已生产16.864亿毫升,产品覆盖全国,销往34个省市(省、自治区、直辖市、计划单列市、建设兵团),销售收入为6.86亿元,已纳税5700元。
[成果] 1500520282 甘肃
S85 应用技术 农药制造 公布年份:2015
成果简介:口蹄疫是世界性重大动物疫病,中国是该病危害最严重的国家之一。鉴于当时对口蹄疫的流行病学、病原学和免疫学缺乏系统研究,疫苗、诊断等防治技术严重匮乏和落后的局面,为解决该病防治中的这些重大科学问题和关键技术,该项目历时18年,创建了口蹄疫病毒毒株库,创制了安全高效疫苗和国际先进诊断技术,为中国有效防治口蹄疫提供了强有力的科技支撑,取得了重大社会、经济和生态效益。探明了中国口蹄疫的流行规律,发现了一系列新毒株和变异毒株,明确了代表毒株的遗传衍化和抗原匹配关系,创建了包括历史毒株、疫苗毒株和代表流行毒株的口蹄疫病毒毒株库,选育获得优良疫苗毒种。系统采集了中国口蹄疫毒株,分析了代表性毒株的分子衍化关系,揭示了流行规律,创建了包含历史毒株、疫苗毒株和代表流行毒株133株的国内唯一口蹄疫病毒毒株库,从中选育了11株优良疫苗毒种,其中3株已被农业部推荐用于全国疫苗生产。该库的建立为疫苗和诊断技术研发及疫病防控奠定了科学基础。攻克了抗原浓缩、保存和稀释的技术难点,创新了疫苗生产关键工艺技术,创制了3种疫苗。建立了制苗种毒快速选育技术,突破了多价疫苗制造技术瓶颈。病毒抗原浓缩36〜85倍,有效病毒抗原146S回收率提高至98.32%。前瞻性创制了国家战略储备的3种灭活疫苗,免疫效力达到4.73〜8.10P。创立了口蹄疫分子定型、抗体检测和鉴别诊断等一系列新技术、新方法,创制了6种诊断试剂盒,实现了口蹄疫诊断技术的标准化与国际接轨。形成了中国口蹄疫检测技术体系,诊断方法的敏感性98%〜100%,特异性95%〜100%。已成为农业部指定应用的诊断和检测方法。该成果已在国内31个省(市、区)推广应用,实现销售收入82877.38万元、新增利润24863.21万元、新增税收9199.39万元,成果应用产生社会经济效益982.25亿元。诊断试剂盒推广应用57844个,可检测1095.34万份样品。A型苗和双价苗作为战略储备疫苗,在2003年和2009年突发A型口蹄疫疫情时国家指令紧急启用,现已作为唯一产品在全国广泛使用。三价苗已转让给生产企业进吞产业化开发。已获农业部中华农业科技一等奖1项,大北农科技成果奖1项,国家二类新兽药证书2项,国家三类新兽药证书6项,国家发明专利7项,农业行业标准2项,发表论文270篇。促进了本学科的发展,推动了行业技术进步,提升了口蹄疫的防控水平和国际影响力。
[成果] 1600160392 广东
S85 应用技术 技术检测 公布年份:2015
成果简介:该研究采用HRMA、荧光PCR和LAMP等技术对各类重要养殖动物寄生虫(如华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫、肝片吸虫、鲁道夫对盲囊线虫、有齿食道口线虫等),动物及动物产品中的重要致病菌(如阪崎肠杆菌、副溶血性弧菌等),动物重要病毒(如对虾传染肌肉坏死病毒等)开展分子检测技术研究,应用高通量测序技术RNA-SEQ获得抗药检测分子标记并建立荧光PCR分子检测方法。该研究详细解析了华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫、鲁道夫对盲囊线虫、有齿食道口线虫、四棘食道口线虫线粒体全基因组序列,同时开展了系统发育分析和miRNA表达谱分析,研究还开展了华支睾吸虫miRNA表达谱分析,对猪有齿食道线虫和四棘食道线虫MSPs进行测定分析。研究还采用了PCR-SSCP等方法对不同地区异尖线虫开展分类研究。
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