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猪脂肪细胞膜基因工程抗体的研究
成果信息
立项支持
  • 公布年份:
    2008
  • 中图分类:
    S852.4
  • 关键词:
  • 成果简介:
    随着人们对健康问题的日益重视,减少动物体内过量的脂肪已成为人们普遍关注的问题。过量的脂肪不仅降低了肉的品质,而且不利于人类健康。因此,研究人员一直在探索降低动物体脂的有效方法。研制和应用抗猪脂肪细胞膜抗体是一个重要手段。本研究采用删减免疫法免疫动物,从经免疫的小鼠脾脏中提取mRNA,RT-PCR扩增VH、VL 基因片段,经重叠引物延伸PCR把VH与VL用Linker连接成单链抗体ScFv基因,克隆入噬菌粒pCANTAB5E载体,用M13KO7超感染,获得了抗猪脂肪细胞膜抗体噬菌体文库。经猪脂肪细胞筛选后,获得了抗猪脂肪细胞膜ScFv。构建了一个天然鼠源噬菌体抗体文库,用猪IgG筛选得到了抗猪IgG ScFv。将以上ScFv相连接,构建成双链抗体表达载体pET-BisFv并进行了表达。初步研究结果显示,表达的BisFv对猪脂肪细胞有高度的特异性和良好的生物学活性。抗猪脂肪细胞膜基因工程抗体的制备,在迄今所见到的国内外现有文献中均未见报道,是本领域前沿的开创性研究新成果。可为研究脂肪细胞分化提供有益线索;对减少猪的脂肪含量,提高胴体品质,具有重要的实际应用价值。
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