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MDCK细胞高密度培养关键技术研究及应用
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  • 公布年份:
    2017
  • 中图分类:
    S859.79
  • 关键词:
  • 成果简介:
    禽流感是严重危害禽类的传染病,接种疫苗是预防本病的最有效措施,传统的禽流感疫苗用鸡胚培养生产,其生产周期长、易污染、批量和质量受限,如遇禽流感爆发会导致鸡胚供应困难,1995年WHO推荐研制基于哺乳动物细胞培养的疫苗。通过甘肃省科技重大专项《MDCK细胞高密度培养关键技术研究》等项目的支持,从ATCC引进贴壁培养型MDCK细胞,进行了细胞全悬浮培养的驯化、个性化无血清培养基开发、生物反应器大规模高密度培养工艺开发、重组禽流感病毒(H5亚型)的高效表达及病毒收获研究以及疫苗的效力、安全性、免疫持续期、保存期等研究。使MDCK细胞在1000L-6000L生物反应器中无血清全悬浮培养的密度达1.0×10^7/ml以上,接种重组禽流感病毒(H5亚型)的血凝价(HA)达1:256-1024,疫苗符合《中华人民共和国兽药典》的规定,开发了具有自主知识产权的基于MDCK细胞生物反应器无血清全悬浮培养的禽流感疫苗整体生产工艺。研究成果禽流感疫苗整体生产工艺在新疆天康畜牧生物技术股份有限公司(现更名为:天康生物股份有限公司)旗下的吉林曙光生物技术有限责任公司(现更名为:吉林冠界生物技术有限公司)进行了转化,该公司先后取得了重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-4株,细胞源)和(H5N1,Re-6株+Re-8株,细胞源)、重组禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株+Re-8株,细胞源)的新兽药证书,产品批量生产,正在申报Re-9株和Re-10株得新兽药证书。研究成果MDCK细胞个性化无血清培养基在项目参加单位兰州百灵生物技术有限公司转化批量生产。该项目的成功实施加快了中国禽流感疫苗从传统鸡胚培养工艺向哺乳动物细胞生物反应器大规模培养工艺转型升级的步伐,同时有助于改变中国无血清个性化培养基长期依赖进口的局面。由于该项目的成功实施,使团队申报2015年国家科技重大专项国家重大新药创制《MDCK细胞生物反应器悬浮培养技术平台的建立及四价流感病毒裂解疫苗临床前研究》批准立项,为中国开发MDCK细胞生产流感疫苗做前期研究,具有重要的社会意义。
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