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毒力因子OipA应用于幽门螺杆菌高毒株感染诊断与预防
成果信息
立项支持
  • 公布年份:
    2017
  • 中图分类:
    R570.4
  • 关键词:
  • 成果简介:
    幽门螺杆菌(Hp)是引起消化系统疾病的病原菌,感染机体后是否致病以及致病的严重程度与其毒力密切相关。因而针对高毒力Hp感染的诊断、预防和治疗具有十分重要的意义。该课题组在4个科技项目的资助下开展了系列研究,在确定OipA为Hp的重要毒力标志,且其在变异的球形菌中仍高表达的基础上,将其应用于制备针对高毒力Hp的诊断试剂和候选疫苗,研究成果获得国家专利1项,在SCI源(如Vaccine)权威等杂志发表论著11篇,被引用总次数达131篇次。主要成果如下:在球变幽门螺杆菌中高表达的标志性毒力因子筛选:该项目在研制能抗Hp及其球变菌疫苗的过程中,首先从基因转录水平检测25种基因在球形Hp中的表达,发现oipA是球形Hp相对高表达(与野生菌接近)的基因之一。对临床分离的106株Hp进行oipA基因功能状态检测,并分析其与临床疾病之间的关系,结果显示在溃疡和萎缩性胃炎中,功能性oipA(oipA基因的信号区处于“开放”状态,可编码OipA蛋白)的检出率均显著高于cagA。表明功能性oipA与严重消化系统疾病关系更为密切。首次确定OipA可作为Hp高毒力菌株的标志物,且其在球形Hp中相对高表达。基于OipA的高毒力Hp快速诊断试剂的研制:克隆表达重组OipA和UreB,利用ELISA方法对临床收集的血清标本进行检测,结果显示OipA重组蛋白检测血清抗体的敏感性和特异性分别为95.16%和95.83%,均高于CagA的77.97%和87.50%。以UreB重组蛋白检测血清抗体的敏感性和特异性分别为100%和90%。首次将OipA和UreB制成金标渗滤检测卡,用于检测临床血清标本,能有效判定Hp感染状态并判断是否为高毒株感染。该试剂具有敏感性高、特异性好、简便、快速和经济等优点,已被多家医院用于临床辅助诊断,作为决定是否对Hp进行根除性治疗的依据,取得较好的效益。获得国家发明专利1项(ZL200710009200.3)。基于oipA的抗Hp感染核酸疫苗研制:构建pcDNA3.1-oipA、pVAX1-oipA核酸疫苗,或联合IL-2和LTB佐剂,肌注或基因枪接种小鼠,结果显示oipA核酸疫苗通过诱导机体的体液免疫和细胞免疫起到抗高毒力Hp的免疫保护和抗菌治疗作用,且对球变菌具有抵抗作用,IL-2和LTB可增强免疫效果。继而采用鼠伤寒沙门菌菌蜕系统制备oipA口服疫苗,并通过oipA基因序列的优化提高免疫保护率,获得接种方便、安全、用量小,可诱导黏膜免疫,产生有效保护作用的疫苗。特色在于:开发oipA疫苗及其免疫剂型,使其兼具预防性、治疗性和抗球变菌的免疫保护作用。重要结果发表于SCI源论文,被引用44篇次。多篇权威SCI综述和论著,如Cancer Immunolo Res(IF=8.284)用较长或整段篇幅引用了该研究成果。
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