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小熊猫微卫星标记的分离及其在亲子鉴定上的应用研究
成果信息
立项支持
  • 公布年份:
    2014
  • 中图分类:
    S864.3
  • 关键词:
  • 成果简介:
    任务来源:成都大熊猫繁育研究基金会项目。应用领域和技术原理:该研究属濒危野生动物保护生物学领域,涉及遗传学、管理学原理。在保护遗传学方面,应用dyNal磁珠富集技术获得了新型的小熊猫微卫星标记;并在此基础上,建立了小熊猫微卫星分型技术、实现了圈养小熊猫的亲子。将亲子鉴定和遗传多样分析的结果用于圈养种群的遗传管理,避免了近亲繁殖,同时将种群的遗传多样性损失降低到最低水平,保证了圈养种群的健康繁殖。成果的创造性、先进性:该研究采用磁珠富集法,开发小熊猫微卫星标记获得了27个小熊猫微卫星位点(GENEbaNk登记号从EF408640-EF408655,EF620036-EF620046)。筛选后得到具有重复性好多态性高的新型小熊猫微卫星标记10对,并建立了这些标记相应的基因分型技术。以上位点在生产中得到了应用,并取得了良好效果。这些成果的取得,都是此前研究所未能实现的。利用已筛选的10个四碱基多态性微卫星位点,进行基因分型和数据分析,首次对能准确进行个体识别(电子芯片标记)的小熊猫群体进行亲子鉴定,并绘制出成都大熊猫繁育研究基地小熊猫圈养种群谱系图。此前未见任何关于小熊猫亲子鉴定的公开发表文献。通过PcR扩增、克隆、测序和引物设计等,首次建立了利用rEFractOryMUtatIONSyStEM(aRMS)技术检测小熊猫ZFX/ZFY基因第四外显子上的特异序列而进行的性别鉴定的方法。。新的aRMS技术小熊猫性别鉴定方法的开发,为小熊猫野外数量调查中的性别比率评估提供了准确可靠的方法。课题组的这套性别鉴定技术的稳定性和准确性在血液,毛发以及粪便来源的dNa样品中得到了验证。在圈养及野外小熊猫上均获得了成功。
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