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柑桔衰退病毒的RT-LAMP快速检测方法
成果信息
立项支持
  • 公布年份:
    2014
  • 中图分类:
    S432.41
  • 关键词:
  • 成果简介:
    该项目属于生物技术领域,公开了一种柑桔衰退病毒的环介导逆转录等温扩增(RT-LAMP)检测方法。灵敏度比普通逆转录-聚合酶链锁反应(RT-PCR)高100倍,对病毒早期诊断准确性更高。该项目与RT-PCR方法检测结果一致,比DTBIA方法灵敏、准确。该项目方法可快速、准确、灵敏地检测柑桔衰退病毒,适合样品快速检测、CTV流行监控、脱毒苗木鉴定和衰退病毒的鉴别。该项目根据GenBank公布的柑桔衰退病毒(CTV)不同株系的基因序列,针对柑桔衰退病毒序列保守区域设计了CTV的RT-LAMP检测方法的特异性引物2对,一对外引物F3、B3和一对内引物FIP、BIP,2对引物序列。以提取样本总RNA为模板,建立了快速检测柑桔衰退病毒的RT-LAMP技术。该项目RT-LAMP检测技术利用特异引物(4条),以识别柑桔衰退病毒靶基因的几个特定区域,特异性更强。反应在等温(63℃)条件下进行,不需要循环仪等昂贵的仪器,扩增反应极快,一般35-60分钟完,扩增产物量大,利用电泳检测或荧光染料技术鉴定出待测样品中是否含有柑桔衰退病毒;灵敏度高、特异性强,适合病毒的快速准确检测。
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